Máy Tính Nồng Độ Protein

Danh mục: Sinh học
- Tháng 6 29, 2025
| |
Giá trị điển hình dao động từ 0.5 đến 2.0
Cuvette tiêu chuẩn có chiều dài đường đi 1 cm
Nếu mẫu đã được pha loãng trước khi đo (ví dụ: 5 = pha loãng 1:5)

Nồng độ protein sử dụng độ hấp thụ tại 280 nm (A280) được xác định bằng Định luật Beer-Lambert:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

trong đó:

  • \( C \) = Nồng độ protein (mg/mL)
  • \( A \) = Độ hấp thụ tại 280 nm
  • \( \epsilon \) = Hệ số tuyệt đối (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Chiều dài đường đi của cuvet (cm)

Máy Tính Nồng Độ Protein là gì?

Máy Tính Nồng Độ Protein giúp xác định nồng độ protein bằng nhiều phương pháp khác nhau, bao gồm:

  • Độ hấp thụ tại 280 nm (A280): Một phương pháp nhanh chóng và không phá hủy dựa trên các axit amin thơm.
  • Phép thử Bradford: Một phương pháp màu dựa trên sự liên kết của thuốc nhuộm.
  • Phép thử BCA (Axit Bicinchoninic): Một phương pháp dựa vào sự khử đồng và phát hiện màu.
  • Phép thử Lowry: Một phương pháp đã được thiết lập tốt sử dụng tương tác protein-đồng.

Cách Sử Dụng Máy Tính

Thực hiện các bước sau để tính toán nồng độ protein:

  • Chọn phương pháp đo (A280, Bradford, BCA hoặc Lowry).
  • Nhập các giá trị cần thiết như độ hấp thụ, hệ số pha loãng và hệ số tuyệt đối (nếu cần).
  • Nếu sử dụng phương pháp đường chuẩn (Bradford, BCA hoặc Lowry), nhập các tham số của đường chuẩn.
  • Nhấn nút "Tính toán" để nhận kết quả nồng độ.

Lợi Ích Của Việc Sử Dụng Máy Tính

  • Tiết kiệm thời gian bằng cách tự động hóa các phép tính nồng độ.
  • Hỗ trợ nhiều phương pháp đo để linh hoạt.
  • Bao gồm máy tính pha loãng để chuẩn bị nồng độ cụ thể.
  • Giảm thiểu sai sót do con người trong các phép tính thủ công.

Các Câu Hỏi Thường Gặp

1. Phương pháp Độ hấp thụ (A280) chính xác như thế nào?

Phương pháp A280 thường chính xác cho các protein tinh khiết nhưng có thể bị ảnh hưởng bởi các tạp chất như axit nucleic.

2. Tôi có thể sử dụng Phép thử Bradford cho tất cả các protein không?

Phép thử Bradford hoạt động tốt cho hầu hết các protein nhưng có thể cho kết quả biến đổi tùy thuộc vào thành phần protein.

3. Lợi ích của Phép thử BCA là gì?

Phương pháp BCA tương thích hơn với các chất tẩy rửa và có dải tuyến tính rộng hơn so với Bradford.

4. Làm thế nào để tôi chọn hệ số tuyệt đối đúng cho A280?

Sử dụng các giá trị đã công bố cho các protein đã biết, hoặc tính toán hệ số tuyệt đối dựa trên thành phần axit amin.

5. Tại sao tôi cần một hệ số pha loãng?

Nếu mẫu của bạn được pha loãng trước khi đo, bạn phải nhân nồng độ đã tính toán với hệ số pha loãng để có được nồng độ cuối cùng chính xác.